The effect of storage conditions on the preanalytical stability of Anti-SARS-CoV-2 antibodies in whole blood samples
Abstract
Background: To combat the ongoing coronavirus disease 2019 (COVID-19) pandemic
caused by severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 (SARS-CoV-2), mass-scale
antibody testing is occurring. It is important that test results are accurate, yet varying
preanalytical storage conditions could potentially influence antibody stability, resulting in
false titer values.
Aim: This study primarily aims to investigate the effects of the preanalytical storage
conditions of time, temperature, and collection tube type on Anti-SARS-CoV-2 antibody
stability in order to allow for accurate interpretation of measured titer values. Additionally, it
aims to determine if there is a correlation between titers and disease severity.
Method: Participants with previously confirmed or suspected COVID-19 completed a
questionnaire regarding their symptoms. An initial T0 blood sample was collected and
analyzed. Additional samples were collected in two pairs of serum and
ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA) tubes and stored in either room temperature or 4°C.
Aliquots were removed and analyzed on days 1, 3, and 5. Resulting titer values were analyzed
using Spearman’s correlation and Wilcoxon signed-rank test. 2
Results: Fifteen participants were included. A slight titer decrease over time was observed in
both serum and EDTA groups but was only significant in the EDTA group (room temperature
p=0.050, 4°C p=0.018). The average decrease in the EDTA groups was 5.0AU/mL in room
temperature and 4.5 AU/mL in 4°C. A significant correlation between T1, T3, T5, and T0 was
observed in all groups with high r-values ranging from 0.883 – 0.995. No correlation was
found between T0 titers and disease severity.
Conclusion: Titers in both serum and EDTA groups remained stable over time with no
dramatic decreases regardless of storage conditions and can therefore be accurately
interpreted. The slight antibody instability observed in the EDTA groups was minimal and
considered clinically irrelevant but more research needs to be conducted to further investigate
the results.
Degree
Student essay
Other description
Det har förmodligen inte undgått någon att vi befinner oss mitt i en pandemi. Länder över hela världen försöker bekämpa viruset SARS-CoV-2 (”severe acute respiratory syndrome coronavirus 2”), vilket orsakar sjukdomen “Coronavirus disease 2019”, mer känt som COVID-19. Det finns dock fortfarande många frågor som forskningen försöker besvara. Några viktiga frågor rör områden som innefattar virusets spridning och om en genomgången COVID-19 infektion gör dig immun mot återinfektion. Detta har lett till en dramatisk provtagningsökning globalt för att både individer, regeringar, och forskare ska kunna få information om smittspridning, sjukdomsfall, och immunitet. De med pågående infektioner testas via svalgprov, medan de som har återhämtat sig kan ta ett blodprov för att mäta antikroppsnivåer. Vad gäller antikroppstester så har ett positivt testresultat bedömts av svenska Folkhälsomyndigheten att ge upp till 6 månaders immunitet. Längre än så vet vi dock inte hur immuniteten påverkas och det pågår oerhört mycket forskning kring ämnet. Så mycket testning som just nu pågår leder till att laboratorier jobbar under maximal kapacitet vilket potentiellt kan leda till att de blir överväldigade. I vissa fall kan det ta flera dagar innan blodprover analyseras och proverna förvaras under olika förhållanden under den tiden. För att säkerställa att antikroppstesternas resultat är så exakta som möjligt, ville vi studera om de uppmätta antikropparna speglade de sanna, originella antikroppsnivåerna, trots flera olika förvaringsförhållanden som potentiellt skulle kunna påverka antikropparna i blodproverna. Vi tittade på effekterna av tid, förvaringstemperatur och blodrörstyp för att svara på denna fråga. COVID-19 antikroppstester (blodprover) togs på 15 personer där analys gjordes omedelbart. Sedan togs ytterligare prover som förvarades i två typer av rör (serum och ”ethylenediaminetetraacetic acid” härefter förkortat EDTA) och i två olika temperaturer (rumstemperatur och 4°C) i 5 dagar. Vi såg att nivån av antikroppar efter 5 dagar under dessa förhållanden förblev mycket nära dem från det första blodprovet, vilket antyder att tid, förvaringstemperatur, och rörtyp inte påverkar antikroppsnivåer och testresultaten mest troligt kan litas på. Vi såg en mycket liten minskning av antikroppar i de prover som förvarats i EDTA-rör, vilket inte är kliniskt relevant men betyder att fler studier bör göras på ämnet för att se om de kan återskapa samma resultat och se om detta var ett faktiskt resultat eller orsakat av en okänd faktor. Dessa resultat betyder att vi med mest sannolikt kan lita på uppmätta antikroppsnivåer och testresultat så att de kan användas för att möjliggöra mer forskning om COVID-19-spridning och immunitet, data som förhoppningsvis kan användas för att skapa ett vaccin eller behandla sjukdomen på olika sätt. Ju mer vi kan lita på våra tester, desto mer kan vi förstå pandemin och bekämpa spridningen av viruset och medan mer forskning behöver göras är vår studie ett steg i rätt riktning.
Collections
View/
Date
2021-08-03Author
Lind, Alexa
Keywords
SARS-CoV-2
COVID-19
preanalytical stability
antibodies
Series/Report no.
Examensarbete 30 Hp, Läkarprogrammet
Student Essay
Language
eng